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淺談提高液相色譜柱柱效的幾種方法

更新時間:2019-01-07      點擊次數(shù):2677

1、提高液相色譜柱柱效的方法

(1)降低移動相的流速,但會使分析時間延長。

(2)減少固定相的量,但色譜柱中樣品的負載量也隨之減小。

(3)減小固定相的顆粒度,但不能過分,過分后色譜柱的滲透率也會減小。

(4)選用低粘度的移動相,以利于快速傳質(zhì),但卻不利于多組份分析。

(5)適當提高柱溫,可降低移動相的粘度,但柱效和分離度也隨之降低。

(6)盡量減小停滯移動相的體積,但卻加快了移動相的流速。

    從以上介紹可看出,在色譜分析過程中,各種因素是互相聯(lián)系和制約的。只有通過對柱效值的跟蹤測算,對自己分析方法不斷的研究和實踐,才能找到*的工作條件。

2、對柱效值進行跟蹤測算應(yīng)注意的問題

   柱效值并不足以預(yù)測在所有條件下的柱性能,對大多數(shù)色譜工作者來說,柱性能指的是色譜柱用于特定分離的能力,而僅僅有高柱效并不能保證這種分離能力。

    不管用什么特定的測試方法,都會有幾個參數(shù)影響柱效的測定。這些參數(shù)包括:洗脫液的成分和粘度及其線流速,測定塔板數(shù)所用的溶質(zhì),溫度,柱長,填料裝填方式,顆粒度,還有所選用的測量和計算方法。而測量和計算方法對柱效值的確定起著極大的作用。

3、幾種測量和計算柱效值的方法

   因為色譜峰是假定樣品濃度在移動相和固定相中呈正態(tài)分布而得到的樣品譜帶分布,故常常把色譜峰型看作正態(tài)曲線來計算理論塔板數(shù)。因此計算柱效(以理論塔板數(shù)n為單位)的公式習慣上定義為:n=t²R/σ²=a(tR²/ωb²)

    式中tR為色譜峰的保留時間;σ2是以時間為單位測量色譜峰的偏差;a是和峰高(從測峰寬的基線量起)有關(guān)的常數(shù),ωb是峰寬,表示由色譜峰頂點與色譜峰兩側(cè)拐點處做切線與峰底基線相交兩點間的距離。

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